Новый метод исследования тканевых изменений при сахарном диабете заключается в одновременном контроле компартментов микроциркуляции: кровотока и лимфотока и окислительных коферментов. Метаболические процессы клеточных структур ткани энергозависимы. Изменение энергетического обмена лежит в основе большинства функциональных и энергетических нарушений в тканях. Все энергетические нарушения реализуются на молекулярном уровне [1]. Развитие сахарного диабета связано с энергетическим дисбалансом, с нарушением тканевого адекватного энергообразования в результате дефицита аэробного окисления глюкозы.
   Диагностика основана на одновременной оценке активности тканевых коферментов: восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (НАДН) и окисленного флавинадениндинуклеотида (ФАД) способом флуоресцентной спектроскопии [2,3] и показателей микроциркуляции кровотока и лимфотока методом лазерной допплеровской флуометрии в трех состояниях ткани: покой, охлаждение при 10°С (снижение активности микроциркуляции и метаболизма) и нагрев при 35°С (повышение активности микроциркуляции и метаболизма) [4].
     Исследование реакции ткани при охлаждении до 10°С и нагреве до 35°С позволяет оценить изменения как микроциркуляции, так и концентрации коферментов относительно исходного состояния. При охлаждении снижается утилизация субстрата и коферментов, при нагревании активируется утилизация субстрата и коферментов. Чем более выражены изменения в концентрациях НАДН и ФАД при пробе с нагревом, регистрируемые через изменения величин амплитуд флуоресценции, тем меньше утилизировано субстрата и коферментов в исходном состоянии ткани, значительнее снижение окислительного метаболизма у пациента. Нормализация окислительного метаболизма связана с восстановлением утилизации субстрата и коферментов. Концентрация коферментов должна быть в пределах контрольных значений.
        В величины приращения (при охлаждении) или уменьшения (при нагреве) амплитуд флуоресценции коферментов не входит флуоресценция коллагена, как одного из доминирующих флуорофоров в коже [5]. Нагрев и охлаждение при указанных температурах не изменяет содержание коллагена в ткани.  При расчете величин изменения амплитуд флуоресценции НАДН и ФАД добавка от коллагена как постоянная величина, константа,  вычитается.
      Выбор температуры нагрева 35°С обусловлено несколькими обстоятельствами. Первое - при 35°С не происходит денатурации белка, в том числе коллагена [1]. Второе - эта температура находится вблизи диапазона 38-40°С, при которой наибольшая скорость ферментативных реакций [1]. Также при 35°С возрастает активность местных регуляторных механизмов кожного кровотока [4], приводящая к увеличению функционирующих капилляров микроциркуляторного русла кровотока.
      При охлаждении, как известно, в ткани происходит холодовая вазодилатация, которая не позволяет однозначно зарегистрировать реакции замедления метаболизма из-за увеличения кровотока, как источника нагрева ткани. Охлаждение при 10°С обусловлено методикой оценки реакции ткани, именно при такой температуре время до наступления холодовой вазодилатации около 1 минуты, в течение которой возможно корректно получить данные по ослаблению утилизации субстрата и коферментов.

           
1. Березов Т.Т.. Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник.- 3-е изд.. стереотипное.-М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2008.
2. Mayevsky A. Rogatsky G.G. Mitochondrial function in vivo evaluated by NADH fiuorescence: from animal models to human studies// Am. J. Physiol. Cell Phisiol.-  2007.-v.292, №2- pp. C615-C640.
3. Mokry M., Gal P. and et.al. Experimental study on predicting skin flap necrosis by fliorescence in the FAD and NADH bands during surgery// Photochem. Photobiol. - 2007. - v.83, n.5. - pp. 1193-1196.
4. Лазерная допплеровская флоуметрия микроциркуляции крови/ Под ред. А.И. Крупаткина, В.В. Сидорова: Руководство для врачей.-М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005.
5. Оптическая биомедицинская диагностика. В 2 т. Т.2 /Пер. с англ. под ред. В.В. Тучина. - М.: ФИЗМАТЛИТ, 2007, стр. 158.